Utvikling og optimalisering av LC/MS-MS metode for kvantifisering av 11-ketotestosteron i plasma fra atlantisk laks.

Abstract

En studie ble gjennomført for å optimalisere et derivatiseringsreagens for derivatisering av 11-ketotestosteron (11-KT), som ble analysert ved bruk av væskekromatografi – koblet til massespektrometri (LC/MS-MS). 11-KT er en viktig biomarkør for tidlig kjønnsmodning hos fisk, og en nøyaktig måling av denne biomarkøren er essensiell for fiskehelse og oppdrett.

Studien fokuserte på optimaliseringsprosessen for å indentifisere det mest effektive derivatiseringsreagenset som kunne tilsettes direkte i toppfasen under SALLE -metoden. SALLE – metoden ble valgt som prøveopparbeidelsestrinn på grunn av sin effektivitet i å isolere og oppkonsentrere 11-KT fra komplekse matrikser, noe som forbedrer påvisningsgrensen og kvantifiseringen av biomarkøren.

Den påvisbare grensen (LOD) for 11-KT ble bestemt til å være 0,14 ng/mL, mens kvantifiseringsgrensen (LOQ) ble funnet ved 0,31 ng/mL. Recovery av 11-KT ble målt ved spiket kalveserum og er 95,8 %. Repeterbarhet ligger på 1,9% og reproduserbarhet ble også evaluert og ligger på 5,9%.