| dc.description.abstract | Myeloperoksidase (MPO) er et enzym som hovedsakelig produseres i aktiverte nøytrofile granulocytter. MPO er involvert i produksjon av underklorsyrling (HOCl), som er et bakteriedrepende stoff og en sterk oksidant. HOCl har evnen til å reagere med andre molekyler og forårsake oksidativt stress.
Oksidativt stress oppstår ved ubalanse mellom produksjon av oksidanter og kroppens evne til å nøytralisere dem. Advanced oxidation protein products (AOPP) har blitt brukt som mål på graden av oksidativt stress hos nyrepasienter og pasienter med kroniske inflammasjonssykdommer. Det er rapportert at økt MPO-aktivitet i aktiverte nøytrofile granulocytter under oksidativt stress kan bidra til produksjon av AOPP.
MPO måles hovedsakelig ved hjelp av ulike ELISA (enzyme-linked immuno sorbent assay) tester, men de kommersielle settene er kostbare i innkjøp. Formålet med denne oppgaven var først å utvikle et elektrokjemiluminescens immunoassay, hvor man coater plate med MPO antistoff og leser av signalet med mesoscale discovery (MSD) sector imager 2400 instrument. Deretter var målet å sammenlikne egen metode med et tilgjengelig kommersielt sett for analyse av MPO. Til slutt skulle både MPO og AOPP hos nyre-og psoriasispasientgrupper måles for å se om det er sammenheng mellom konsentrasjonene.
MSD-sett til metodeutviklingen viser sannsynligvis deteksjon av primært- eller deteksjonsantistoffer, men ikke deteksjon av MPO. Derfor bør metoden utvikles videre.
Det kommersielle MSD-settet ble validert med hensyn på kalibreringskurve, mellomplatevariasjon (CV), deteksjonsgrense, linearitet og gjenfinning. Kalibreringskurvene fikk best kurvetilpasning med R2 ≥ 0,995 og residualer ≤15%. CV var 6,5 %, deteksjonsgrensen 69 pg/ml, linearitet R2 ≥ 0,995 og gjenfinning på 81 %.
MPO-konsentrasjon i plasma hos friske kontroller uten psoriasis (PS-K 12,5 ng/ml) er signifikant lavere, sammenliknet med pasienter med andre hudlidelser enn psoriasis (PS-A, 16,0 ng/ml, p= 0,0100). Hos psoriasispasienter (PS-P, 14,3 ng/ml), var plasma MPO-konsentrasjon ikke signifikant høyere enn hos PS-K (p= 0,0733). MPO-konsentrasjon hos friske kontroller (REN-K, 14,3 ng/ml) er signifikant lavere i forhold til nyretransplanterte (RTX, 18,1 ng/ml, p= 0,048) og pasienter med moderat nedsatt nyrefunksjon (REN 3, 17,6 ng/ml, p= 0,036). Gjennomsnittlig MPO-konsentrasjon hos REN-K er ikke signifikant lavere sammenliknet med pasienter med alvorlig nedsatt nyrefunksjon (REN 4, 17,9 ng/ml, p= 0,118), dialysepasienter (REN 5, 18,6 ng/ml, p= 0,068) og nyre donorer (REN-D, 16,0 ng/ml, p= 0,347).
Det ble ikke observert sammenheng mellom plasma MPO- og AOPP-konsentrasjon hos REN-5 (R2 = 0,0159) og PS-P (R2 = 0,0055) . Derfor kan man ikke påstå at økning i MPO-konsentrasjon påvirker økning i plasma AOPP. | nb_NO |
